核酸凝膠染色

SPEED Biosystems擁有一系列核酸凝膠染色劑，包括GreenView™、GreenView™ Plus、GreenView™ Ultra和RedView™，用于凝膠染色前后染色，以及SafeGreen™和SafeRed™加注染料，用于電泳前與核酸混合。這些染色是下一代熒光核酸凝膠染色劑，旨在替代高度誘變的溴化乙二醇（EB）。這些染料優(yōu)于艾爾巴基，具有高靈敏度、低毒性和*佳穩(wěn)定性。由于成本低且靈敏度普遍足夠，電子核酸被廣泛用于核酸凝膠染色。然而，雌雄胺具有高度誘變性。除污和廢棄物處理相關的安全風險和成本最終可能使染料成本高昂且使用不便。

用于凝膠染色前后染色的凝膠染色（GreenView™、GreenView™ Plus、GreenView™ Ultra 和 RedView™）

優(yōu)點

★ 比 EB 安全。Ames測試及其他檢測顯示其非突變劑且無細胞毒性。

★ 室溫穩(wěn)定。

★ 兼容標準藍光LED和紫外線透光燈。

★ 配合藍光使用可減少凝膠切除及后續(xù)克隆的誘變。

圖1。GreenView™、GreenView™ Plus和GreenView™ Ultra的凝膠染色結(jié)果（左），以及與SYBR Safe™和GelGreen™（右）的對比結(jié)果。左圖：在每個凝膠上分別以25 ng、50 ng和100 ng（從左到右）的3條通道，分別裝入1 kb的DNA梯子（NEB，編號#N0468S）的兩倍序列稀釋液，然后用GreenView™、GreenView™ Plus和GreenView™ Ultra進行后染色。右圖：結(jié)果顯示GreenView™的靈敏度與SYBR Safe™相近，而GelGreen™、GreenView™ Plus和GreenView™ Ultra的靈敏度要好得多。

圖2。用RedView™和GelRed™染色效果。每條凝膠上分別以25 ng、50 ng和100 ng（從左到右）的3條通道，將1 kb的DNA梯子進行兩倍序列稀釋，然后分別用RedView™和GelRed™進行后染色。結(jié)果顯示RedView™與GelRed™的靈敏度相似。

除了比 GreenView™、GreenView™ Plus 和 RedView™ 相比 SYBR Safe DNA 凝膠染色更安全外，細胞通透性更低，因此更安全（見圖3）。

圖3。使用SYBR Safe、GreenView、GreenView Plus和RedView進行細胞通透性測試。Hela細胞是在37歲時孵育的？配備1臺SYBR Safe、GreenView、GreenView Plus和RedView，持續(xù)30分鐘。

GreenView Plus和RedView無法穿透細胞膜以結(jié)合活細胞的DNA，且比SYBR Safe安全得多，后者能迅速進入細胞并染色細胞核。

如何選擇適合你的DNA染色？

凝膠加載染料（SafeGreen™ 和 SafeRed™）

優(yōu)點

★ 配方為6倍加載緩沖區(qū)，隨時可用。

★ 安全無毒，是EB的替代品。

圖4。用SafeGreen™（左）和SafeRed™（右）預混DNA梯進行凝膠染色。

SafeGreen™和SafeRed™專門設計為對細胞膜不透水，從而通過防止染料進入活細胞來降低基因毒性（見圖5）

圖5。使用SYBR Safe™、SafeGreen™和SafeRed™進行細胞滲透性測試。Hela細胞在37oC下與1枚SYBR Safe™、SafeGreen™和SafeRed™一起孵育30分鐘。SafeGreen™和SafeRed™無法穿透細胞膜以結(jié)合活細胞的DNA，且比SYBR Safe™安全得多，后者能迅速進入細胞并染色細胞核。